丽春红染色液的配制与使用
丽春红（ponceau s）也称猩红，可以用于pvdf膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。
丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，pbs或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质n端测序时将sds-page胶上的蛋白转移到pvdf膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。
注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
丽春红染色液的配制
常用的丽春红染色液有两种：一种用乙酸配制，另外一种用三lv乙酸（tva）和5-磺基水杨酸（5-sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下：
一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）丽春红，5%（v/v）乙酸，ddh2o。
4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“0.2%（w/v）丽春红，3%（v/v）乙酸，ddh2o”。
二、用三lv乙酸和5-磺基水杨酸成分：2% （w/v）丽春红，30%的三lv乙酸，30%的5-磺基水杨酸。
丽春红染色液使用说明
将pvdf膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动5-10分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水，pbs或其它适当溶液漂洗2-3次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水，pbs或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的wb检测。
补充：丽春红染色液也可以直接用来染page胶，不过，在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下page胶，起到固定蛋白的作用。
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注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
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常用的丽春红染色液有两种：一种用乙酸配制，另外一种用三lv乙酸（tva）和5-磺基水杨酸（5-sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下：
一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）丽春红，5%（v/v）乙酸，ddh2o。
4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“0.2%（w/v）丽春红，3%（v/v）乙酸，ddh2o”。
二、用三lv乙酸和5-磺基水杨酸成分：2% （w/v）丽春红，30%的三lv乙酸，30%的5-磺基水杨酸。
丽春红染色液使用说明
将pvdf膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动5-10分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水，pbs或其它适当溶液漂洗2-3次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水，pbs或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的wb检测。
补充：丽春红染色液也可以直接用来染page胶，不过，在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下page胶，起到固定蛋白的作用。
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