常温细胞处理方式

细胞(cells)是由英国科学家罗伯特·胡克(robert hooke,1635~1703)于1665年发现的。当时他用自制的光学显微镜观察软木塞的薄切片,放大后发现一格一格的小空间, [1] 就以英文的cell命名之,而这个英文单字的意义本身就有小房间一格一格的用法,所以并非另创的字汇。
当收到了常温的细胞,正确的处理方式应该是怎样的。
一、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。
二、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量丛瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内趋置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
三、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
四、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态;建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
五、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5m左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
六、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离 心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5m培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密,度达80%左右时再进行传代操作。
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