植物组织培养基配置的关键环节说明

以ms培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类。
1、 大量元素和微量元素母液的配制
按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品(如大量元素或微量元素)配在同一母液中。但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效。为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决:①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按先后顺序溶解药品,待前一种药品wan全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推;②使每种成份分别wan全溶解,再把它们彼此混合。
2、 铁盐母液的配制
铁盐的成份含硫酸亚ya铁(feso4·7h2o)和乙二胺四乙酸二钠(na2-edta)。这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀。该方法是:分别溶解feso4·7h2o和 na2-edta,加热并不断搅拌,使之wan全溶解,冷却,将2种溶液混合,调ph至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中。
3、 植物生长调节物质母液的配制
植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的iaa、iba、naa,赤霉素类的ga3,细胞分裂素类的2,4-d、kt和6-ba等。由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同:①iaa,iba和ga3先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中;②naa可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积;③2,4-d可溶于少许1mol/l的naoh溶液中,然后加水定容;④kt和6-ba可用少量1mol/l的hcl溶解,再加水定容;⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容。
植物生长调节物质浓度通常用ppm(mg/ml)和mol/l表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶。
4、 有机附加物母液的配制
在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性。由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-20℃的低温冰箱内。

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