这样操作人elisa酶联免疫试剂盒实验不会失败
在人elisa酶联免疫试剂盒操作过程中总是会出现或大或小的问题，比如说花板、假阳性、全显色、信号值比空白还低等等。今天为大家带来了一些实验经验总结，教您这样操作elisa试剂盒实验不会失败。
1.有的包被原可能不是蛋白，对于*和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法扼要的列出如下：
2.亲和素*：先亲和素先包被载体，加入*化的dna，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。
3.小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以 被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。
4.脂类物质：可将其在有机溶剂中溶解后加入elisa板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质天然干固在固相表面。
5.应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间 的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易 吸附到固相载体表面。包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。 详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下*可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的ph9.6碳酸盐缓冲液，还有 ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。
6.但*选用什么，要依据试验详细来实践。常用封suo剂有：0.05%-0.5%的bsa；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使 用(5%－10%)；还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。封suo就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲， 从而排斥人elisa酶联免疫试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。封suo：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。
gm-csf 尿皮质素抗体
gm-csfr alpha/cd116 尿皮质素ucn3抗体
gm-csfr beta/csf2rb *型纤溶酶原激活因子受体抗体
gna12/g protein alpha 12 *型纤溶酶原激活因子抗体
gng2 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗体
gnly/nkg5 尿调节蛋白抗体
gnmt 尿调节蛋白抗体
gnpat 尿卟啉原脱羧酶抗体
gnrhr 鸟苷酸调节蛋白12抗体
got2 *脱羧酶抗体
gp1b/cd42b 拟南芥iki3抗体
gp65/sdfr1/nptn 拟南介金属离子转运蛋白抗体
人elisa酶联免疫试剂盒
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2.亲和素*：先亲和素先包被载体，加入*化的dna，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。
3.小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以 被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。
4.脂类物质：可将其在有机溶剂中溶解后加入elisa板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质天然干固在固相表面。
5.应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间 的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易 吸附到固相载体表面。包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。 详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下*可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的ph9.6碳酸盐缓冲液，还有 ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。
6.但*选用什么，要依据试验详细来实践。常用封suo剂有：0.05%-0.5%的bsa；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使 用(5%－10%)；还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。封suo就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲， 从而排斥人elisa酶联免疫试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。封suo：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。
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