远慕分享：酶标记抗体的方法步骤
1、hrp标记抗体的方法
酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备hrp结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。
戊二醛二步法
原理
戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。
2、标记步骤
(1)称取hrp25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室温静置过夜。
(2)反应后的酶溶液经sephadex g-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以peg浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。
(3)将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。
(4)用1m ph9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3?小时。
(5)加0.2m赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。
(6)在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1小时。
(7)3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15m ph7.4的pbs中。
(8)将上述溶液装入透析袋中，对0.15m ph7.4的pb缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
黄山防火涂层板量大价优的厂家
Rexroth电磁阀技术参数
LA Exec港口称美国关税调整可能成为“新常态”
硅酮密封胶相容性实验的相关知识介绍
使用臭氧发生器过程中的7大注意事项
远慕分享：酶标记抗体的方法步骤
离心风机的构成和使用
离心风机日常保养注意事项简述
德国HYDAC冷却器介质之间内漏排除方法
Z430双通道轴承振动监测仪
SUN插装式和ATOS组合式平衡阀的比较
凯胜分析膜片联轴器承载能力高
地基承载力检测仪
5510269 OSE-A34-0
DO810
JLD-Q津梁调漆天平/天津固安油漆混合电子天平价格多少
shopee虾皮上新技巧，shopee如何吸引粉丝？
烟气在线监测系统的安装位置应距离烟筒多远合适？
亚马逊上半年GMV断层第一（跨境电商平台最新资讯）
BSC-1500IIB2-X是一款全排医用*
酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备hrp结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。
戊二醛二步法
原理
戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。
2、标记步骤
(1)称取hrp25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室温静置过夜。
(2)反应后的酶溶液经sephadex g-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以peg浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。
(3)将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。
(4)用1m ph9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3?小时。
(5)加0.2m赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。
(6)在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1小时。
(7)3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15m ph7.4的pbs中。
(8)将上述溶液装入透析袋中，对0.15m ph7.4的pb缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
黄山防火涂层板量大价优的厂家
Rexroth电磁阀技术参数
LA Exec港口称美国关税调整可能成为“新常态”
硅酮密封胶相容性实验的相关知识介绍
使用臭氧发生器过程中的7大注意事项
远慕分享：酶标记抗体的方法步骤
离心风机的构成和使用
离心风机日常保养注意事项简述
德国HYDAC冷却器介质之间内漏排除方法
Z430双通道轴承振动监测仪
SUN插装式和ATOS组合式平衡阀的比较
凯胜分析膜片联轴器承载能力高
地基承载力检测仪
5510269 OSE-A34-0
DO810
JLD-Q津梁调漆天平/天津固安油漆混合电子天平价格多少
shopee虾皮上新技巧，shopee如何吸引粉丝？
烟气在线监测系统的安装位置应距离烟筒多远合适？
亚马逊上半年GMV断层第一（跨境电商平台最新资讯）
BSC-1500IIB2-X是一款全排医用*