什么限制了您的文章发表?组织图片自发荧光太亮

在免疫组化检测过程中,许多样本组织会产生可通过各种波长滤光片的组织内源性自发荧光,干扰抗体标记的目的蛋白荧光的观察,甚至导致实验失败。为了解决免疫组化实验中的自发荧光,vectorlabs公司专门开发了一款vector®true view™ autofluorescence quenching kit试剂盒,该产品旨在去除组织切片中由于醛固定、红细胞以及胶原蛋白/弹性蛋白结构造成的自发荧光。该试剂使用方便,无需稀释操作,为即用型试剂。该试剂盒中含有防自发荧光效果excellent的vectashield vibrance antifade mounting media 封片剂(含或不含dapi两种)。客户无需单独购买封片剂,经济、实用。
注意:该试剂盒对脂褐素造成的组织自发荧光无效。
● 试剂盒组成:
a. vector®trueview™ reagent a 5mlb. vector®trueview™ reagent b 5mlc. vector®trueview™ reagent c 5mld. vectashield vibrance antifade mounting media 2mle. vectashield vibrance antifade mounting media with dapi 2ml
其中,货号sp-8400包含a,b,c,d四个组分;货号sp-8500包含a,b,c,e四个组分
●产品使用方法:
将reagenta、b、c以1:1:1的比例混合。(注意混合顺序,先将a和b以1:1比例混合10s,再加入c,混匀10s)
将混好后的trueview试剂滴加到组织样本切片上,将样本完-全覆盖,孵育2-5min
使用pbs缓冲液洗片5次,除去多余缓冲液,vectashieldvibrance media封片后观察
●产品特征
a 显著降低背景染色并保留特异性抗原染色;b 提高信噪比;c 产品稳定,储存在滴瓶中,使用方便;d 操作简单,快速;整个染色过程仅需2-5min;e 为使用者提供清晰、明确、真实的染色结果;f 适用于多种荧光染料的自发荧光去除,包括alexa488,alexa 594,dylight 488,dylight 594,fitc,cyanine 5和gfp;
g sp-8500试剂盒中的封片剂中dapi浓度较高,可对细胞核进行清晰的染色。
●产品对自发荧光淬灭效果:
◆右图为经vector®trueview™kit处理后,人肾脏组织切片中自发荧光淬灭的百分比与处理时间之间的关系。◆note:2分钟内即可达到最大淬灭效果。
●产品应用举例:
> 案例一
未经任何处理 使用vector®trueview™处理
◆ 上图为人脾脏组织染色结果:使用vectafluor tm duet试剂盒(dk-8818)检测的mouse anti-cd20(red)和rabbit anti-ki67(green)对人脾组织切片的染色。◆左图为未经任何处理的染色结果,◆右图为使用trueview™autofluorescence quenching试剂盒染色结果。于未经处理的染色结果相比,经trueview™autofluorescence quenching试剂盒处理后,自发荧光显著减少。
>案例二
◆a-d图为人肾脏切片(石蜡切片)染色结果,实验中使用anti-ae1 /ae3抗体对角蛋白进行染色(绿色)。◆a图未经处理,◆b-d图经trueview™quencher kit处理。自发荧光明显减弱。延长曝光时间,阳性信号强度也随之增强。
>案例三
未经任何处理 使用trueview treatment mounted with vibrance + 3x dapi处理
◆上图为人胰腺组织染色结果:绿色为insulin的染色。◆左图为未经任何处理的染色结果,◆右图为使用trueview treatment mounted with vibrance + 3x dapi(sp-8500)试剂盒染色结果。与未经处理的染色结果相比,经该试剂盒处理后,自发荧光显著减少,核染色显著增强。
>案例四
未经处理(内源性自发荧光) 经trueview™quencher kit处理
company a company b company c
copper sulfate solution sodium borohydride sudan black b
●产品订购信息vector®true view™ autofluorescence quenching kit
产品 货号 规格 染色切片数
vector®true view™autofluorescence quenching kit sp-8400 15ml 100-150
vector®true view™autofluorescence quenching kit sp-8500 15ml 100-150
vector trueviewautofluorescence quenching kit (3ml) sp-8403 3ml ~30
vectashield®hardset™antifade mounting medium h-1400 10ml 100-150
vectashield®hardset™with dpi antifade mounting medium h-1500 10ml 100-150
详情请联系vectorlabs 全国总代理-欣博盛生物科技

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