ace® c18-amide
• 用于方法开发的替代选择性
• 改善极性、酸性、碱性和酚类化合物的分离
• 用于uhplc和hplc的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm颗粒
• 超惰性,可获得蕞佳性能和可重现性
ace c18-amide液相色谱柱
用于提高极性保留和替代选择性
方法开发的理想色谱柱选择
■ 相对c18和c8色谱柱,对极性分子 - 特别是酸类,具有替代选择性
■ 与100%水含量的流动相兼容
■ 用于uhplc、hplc和制备型分离的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm颗粒
■ uv和lc/ms兼容性的低流失
*应用
■ 小分子水溶性分析物和极性化合物
■ h键给予体、酸类、碱类和酚类化合物
■ 小分子多肽
为什么ace c18-amide液相色谱柱可以提供替代选择性?
■ ace c18-amide将c18与极性酰胺基结合在单一配体上
■ 延长间隔区技术可以额外延长色谱柱的使用寿命
利用ace c18-amide液相色谱柱的选择性能力将色谱峰分开
分离度方程可以确定影响分离度的参数:n、α和k。近年来,
重点关注使用超“uhplc”色谱柱(如ace excel 2μm色
谱柱)作为实现分离目标的手段。
然而,选择性往往被忽视。
在影响分离度的三个参数中,选择性是为重要的(参见图1)。
通过利用柱效和选择性,通常可以实现更好和更快的分离。
ace c18-amide液相色谱柱是ace系列键合相的*产品,其可以提供互补选择性和2μm、3μm、5μm和10μm粒径的选择,以开发坚固耐用的uhplc和hplc方法。
图1 n、α和k对分离度(rs)的影响
对于n = 10,000、k = 4和α= 1.1的典型分离
增加n、α或k可以增加分离度(rs),但是从上图可以看出,n或k的增加都会迅速降低回报率。增加选择性(α)则不会发生这个问题,因此其在开发分离方法时是这三个变量中为重要的优化参数。
利用ace键合相的固定相选择性能力将色谱峰分开
图2阐明了两种ace键合相即c18-amide与c18之间的差异。
尽管这两种键合相均可以提供可能的来自它们各自c18链的强疏水作用,但嵌入c18-amide相中的酰胺基会引入额外的相互作用模式,终增加极性化合物的保留并提供替代选择性。
样品:1)* 2)儿茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基邻苯二酚5)3-甲基邻苯二酚 6)4-硝基邻苯二酚
流动相:25:75乙腈/27mm h3po4(溶于水中)
色谱柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.50ml/min
温度:30℃
波长:270nm
ace c18-amiede液相色谱柱可以使极性选择性增强
ace c18-amide与刢先c18 uhplc色谱柱的比较
色谱柱尺寸:50 x 2.1mm
样品:1)* 2)儿茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基邻苯二酚 5)3-甲基邻苯二酚 6)4-硝基邻苯二酚
流动相:25:75甲醇/25mm h3po4(溶于水中)
流速:0.30ml/min
温度:30℃
波长:214nm
比较数据不代表所有应用。
利用替代选择性来进行方法开发
酸性、碱性和中性化合物的分离
样品:1)甲基苯基亚砜 2)吲哚洛尔 3)3-羟基ben甲酸 4)1,2-二甲氧基苯 5)小檗碱 6)杨梅素 7)胡椒碱 8)白杨素
流动相:a = 20mm甲酸铵(溶于水中)(ph 3.0)b = 20mm甲酸铵(ph3.0)(溶于90:10(v/v)甲醇/水中)
梯度:在5分钟内3 – 100% b
色谱柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.60ml/min
温度:40℃
波长:254nm
与100%水含量的流动相兼容
葡萄酒中有机酸的分离
样品:1)草酸 2)酒石酸 3)苹果酸 4)乳酸 5)抗坏血酸 6)柠檬酸
流动相:40mm nh4h2po4(溶于水中)(ph 2.5)
色谱柱:ace excel 3 c18-amide, 250 x 2.1mm
流速:0.21ml/min
温度:25℃
波长:214nm
ace c18-amide可以提供替代选择性
食品和饮料添加剂 - *
样品:1)香草酸 2)4-羟基ben甲酸 3)* 4)4-羟基ben甲醛 5)愈创木酚 6)乙基* 7)*
流动相:a = 0.1%甲酸(溶于水中) b = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分钟内30 – 55% b
色谱柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.00ml/min
温度:40℃
波长:260nm
类固醇
样品:1)* 2)*龙 3)雌三醇 4)皮质酮 5)11a-羟孕酮 6)11-酮孕酮 7)21-羟孕酮 8)β-雌二醇 9)17α-雌二醇 10)17α-乙炔基雌二醇
流动相:a = 0.1%甲酸(溶于水中) b = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分钟内25 – 80% b
色谱柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.40ml/min
温度:25℃
波长:260nm
有保证的可重现性和*可扩展性
ace c18-amide的可重现性扩展
样品:1)* 2)4-羟基ben甲酸 3)乙酰水杨酸 4)ben甲酸 5)2-羟基ben甲酸 6)对羟基ben甲酸乙酯
流动相:35:65乙腈/0.1%tfa(溶于水中)
温度:22℃
波长:254nm
将可用的2μm、3μm、5μm和10μm粒径与从uhplc到制备型hplc规模的一系列柱尺寸相结合,可确保方法可重现地放大或缩小。
图8中的色谱图显示,当硅胶批次和硅烷批次改变时可以获得的可重现性,并当粒径和柱直径改变时可以获得可重现的可扩展性。
产品的可用性和规格
相
官能团
封端
粒径(µm)
孔径(å)
表面积(m2/g)
碳载量
大ph范围
100%水相兼容
usp列表
ace c18-amide
具有完整酰胺极性基团的十八烷基
是
2, 3, 5, 10
100
300
16.4
2.0-8.0a
yes
l1/l60
为了获得蕞佳色谱柱寿命,*使用2-8的ph范围。为了在较高的ph值下增加色谱柱寿命,必须考虑有机缓冲液、低缓冲液浓度、高%有机溶剂和低温。
为了在hplc条件(高达5000psi/350bar)下进一步延长色谱柱寿命,*使用ace保护柱芯柱或ace hplc柱前过滤器。
为了在uhplc条件(高达15000psi/1000bar)下进一步延长色谱柱寿命,*使用ace uhplc柱前过滤器。
对于高达5000psi(350bar)的hplc色谱柱连接器,*使用peek手紧接头(p/n ace-cc10)。
对于高达15000 psi(1000bar)的uhplc色谱柱连接器,*可重复使用的接头(p/n exl-cc10)。
ace®是advanced chromatography technologies limited的注册商标。ace excel™是advanced chromatography technologies limited的商标。advanced chromatography technologies limited承认agilent technologies inc.、phenomenex inc.、thermo fisher scientific和waters corporation的注册和未注册商标,且与上述这些公司没有任何隶属关系。
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