液相色谱分析倍他乐克片降解产物中的应用
摘要agilent 1200 系列液相色谱方法开发解决方案具有最大的灵活性和高度自动化。本文将该系统用于寻找分析药物降解产物的最佳分离条件。以倍他乐克片为例，将其暴露在高温条件下，使其产生降解产物，在几根色谱柱上进行了如下分析：• 用安捷伦化学工作站方法筛选向导自动设置方法和序列• 不同选择性的 6 根 agilent zorbax rrht 色谱柱• 不同流动相• 不同温度和梯度
前言在进行新药开发时，分析活性药物的存放期限和稳定性非常重要，必须确保最终的片剂不会生成无法预期和潜在有害的降解产物。这些片剂要在不同条件下进行破坏试验，并分析其降解产物，一般采用hplc 法。为了保证没有其它异常化合物与主成分共洗脱，必须确定所用的分析方法可以分离样品中的所有化合物。因此，需要进行液相色谱分析方法开发。一般来说，为了实现快速筛选，并对方法最终微调获得良好的起始条件，开始要试验一系列色谱柱和溶剂。这种方法筛选过程有助于找到分离目标系列化合物的最适宜色谱柱和流动相。通常，由于整个过程不能自动进行，所以非常费时。agilent 1200 系列液相色谱方法开发解决方案提供了一个高度灵活的系统，最多可以使用 8 根 100 mm 长的色谱柱，或 6 根300 mm 长色谱柱。另外，安捷伦化学工作站的方法筛选向导将自动设置方法和序列，以筛选各种色谱柱、溶剂、预设梯度和温度的组合。另外，为了进行全自动方法开发和优化，该系统还可以与复杂的方法开发软件相结合，如：• 来 自 acd/labs 用于化学工作站的acd/autochrom• 来自 chromsword baltic在本应用报告中，我们将报导：• 以倍他乐克片降解产物为例，如何用安捷伦化学工作站方法筛选向导设置序列• 用 6 根不同色谱柱和两套不同流动相分析降解产物• 用一根色谱柱和两种不同梯度，采用两种不同温度进行微调
实验仪器agilent 1200 系列高分离度快速液相色谱系统，组合了 agilent 1200 系列液相色谱方法开发解决方案。该液相色谱系统由以下模块组成，固件版本 a.06.01 或更高：• agilent 1200 系列 sl 型二元泵，配置脱气机• agilent 1200 系列 sl plus 高效自动进样器• 2 个 agilent 1200 系列 sl plus 柱温箱(g1316c)，已安装阀驱动• 安捷伦方法开发阀工具包，高压• 安捷伦方法开发毛细管工具包，低扩散，适用于短柱• agilent 1200 系列 sl 型二极管阵列检测器（dad）• 几根 agilent zorbax 快速分离高通量（rrht）色谱柱，1.8 µm 填料粒径• 安捷伦化学工作站 b04.01，含安捷伦化学工作站方法筛选向导样品制备2 片含药 50 mg 的倍他乐克片，分别研磨，并 80 °c 加热 3 小时。残渣溶解于 4 ml 水中。用 2 支注射式过滤器去除不溶性颗粒– 先用 minisart 0.8 µm 过滤器，然后用安捷伦 0.45 µm 过滤器。进样 1 微升滤液至液相色谱系统。
结果和讨论安捷伦化学工作站方法筛选向导安捷伦化学工作站方法筛选向导是安捷伦化学工作站的附加软件。用于以简便而合理的方式生成方法和序列表，以筛选选定的色谱柱、溶剂、预设梯度和温度。方法筛选实验的设置包括几步：
• 创建新的筛选实验（图 1）这一步包括为实验和其根文件夹命名并加以说明，通常这是设置一个新实验的开端。或者也可以调用或修改预定义的筛选实验。当最初方法筛选的标准化步骤必须用新样品重复时，这种方式将非常有用。
• 确定筛选实验（图 2）这一步包括选择主要方法和实验范围。在筛选过程中所有保持不变的参数（例如，检测器设置）均来自主要方法。
• 设置色谱柱筛选（图 3）在这个屏幕上，选择了要评价的色谱柱。这里列出的色谱柱必须在仪器界面中的更多柱温箱组合>配置色谱柱屏幕中预先确定>，这样才能被安捷伦化学工作站方法筛选向导自动识别。
• 设置溶剂选择（图 4）安捷伦化学工作站方法筛选向导识别系统中有哪种类型的泵（二元泵或四元泵）。还要确定是外部溶剂选择阀（g1160a）还是内部溶剂选择阀（只用于二元泵）。软件中显示的溶剂为其预先定义的名字。
关键词：柱温箱 脱气机 色谱柱
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结果和讨论安捷伦化学工作站方法筛选向导安捷伦化学工作站方法筛选向导是安捷伦化学工作站的附加软件。用于以简便而合理的方式生成方法和序列表，以筛选选定的色谱柱、溶剂、预设梯度和温度。方法筛选实验的设置包括几步：
• 创建新的筛选实验（图 1）这一步包括为实验和其根文件夹命名并加以说明，通常这是设置一个新实验的开端。或者也可以调用或修改预定义的筛选实验。当最初方法筛选的标准化步骤必须用新样品重复时，这种方式将非常有用。
• 确定筛选实验（图 2）这一步包括选择主要方法和实验范围。在筛选过程中所有保持不变的参数（例如，检测器设置）均来自主要方法。
• 设置色谱柱筛选（图 3）在这个屏幕上，选择了要评价的色谱柱。这里列出的色谱柱必须在仪器界面中的更多柱温箱组合>配置色谱柱屏幕中预先确定>，这样才能被安捷伦化学工作站方法筛选向导自动识别。
• 设置溶剂选择（图 4）安捷伦化学工作站方法筛选向导识别系统中有哪种类型的泵（二元泵或四元泵）。还要确定是外部溶剂选择阀（g1160a）还是内部溶剂选择阀（只用于二元泵）。软件中显示的溶剂为其预先定义的名字。
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