上海通蔚生物原代细胞冻存的正确方法你知道吗?
上海通蔚生物为广大高校、科研院所和企事业单位提供的科研试剂和完善的技术服务，原代细胞满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学elisa试剂盒等生物科技实验需求，积极参与生物领域的技术创新和技术服务。
1.冷冻保存方法:
(1)传统方法:冷存管置于4c10分钟-->-20c30分钟-->-80c 16~ 18小时(或隔夜)-->液氮槽vaporphase长期储存。
-20c不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80c冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3c/分钟之速度由室温降至(-80c以下) -120c，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
(3)hakata无血清细胞冻存： 加入hakata无血清细胞冻存液制成悬液，直接冻于-80°c，可保存≥5年。
2.操作步骤:
(1)冷冻前24-48小时更换半里或全里培养基，使细胞处于指数生长期。
(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚矾(dmso)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。
(3)离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少里细胞悬浮液(约0.1m1)计数细胞浓度及冻前存活率。
(4)取与细胞悬液等里的冻存液，缓慢逐商加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液( dmso醉后浓度为5~ 10%)，使细胞浓度为1~5x 10*cells/ml，混合均匀，分装于已标示*之冷冻保存管中，1~ 2nl/mal,并取.少里细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
上海通蔚生物科技有限公司在全国各大使用单位享有良好的声誉，原代细胞逐步形成了高质量，服务好的品牌效益，本着“为客户提供高质量产品以及*服务”的经营宗旨。
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