台盼蓝染色液实验使用步骤
台盼蓝染液是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的dna结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以检测细胞是否存活。
台盼蓝染色法的原理
正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
实验步骤：
1. 用hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%edta=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3. 再加入适量hanks液制成细胞悬液；
4. 将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6. 染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。
细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。
mtt染色原理，与台盼蓝染色原理有类似之处
活细胞中的某些物质（线粒体中的琥珀酸脱氢酶）能够和mtt反应，使mtt还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞没有此功能。dmso（二甲基亚砜）能够将此结晶（蓝紫色甲瓒）溶解，在酶联免疫检测仪490nm波长处测定其吸光值，能够间接的反应活细胞的数量。一定范围内，蓝紫色结晶沉淀的数量与细胞数成正比。目前mtt法因其灵敏度高，经济快速等优势被广泛的运用于细胞毒性试验，肿瘤药物的筛选、放射敏感性测定和对某些生物活性因子的活性检测（原核真核蛋白表达）等方面。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过mtt比色法进行。
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因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。
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2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%edta=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3. 再加入适量hanks液制成细胞悬液；
4. 将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
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7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。
细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。
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