二手实验室发酵罐的使用方法
二手实验室发酵罐的使用方法
一、实验原理
发酵罐是由3条线路构成的，一个是空气的进出（不进入夹层），蒸汽的进出（只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体，是从夹层的上进下出的），水的进出（进入夹层内，从下进上出。当开始发酵时，水路会形成一个循环，由温度感应器对其进行调节，保证水的温度在发酵所需温度范围内）。
二、实验设备
实验室所用的发酵罐是由蒸汽发生器、空气压缩机、发酵罐和控制系统组成的。
1. 蒸汽发生器：黄灯亮代表需要进水，进水好后红灯亮，自动开始加热。其背后有一阀门， 是控制蒸汽流出的开关，常开。
2. 空气压缩机：摁下开关按钮起开始向储气罐内通入空气
3. 发酵罐:发酵罐上连有电极，当要打开发酵罐时要先将其拆下，避免损坏。在旋紧发酵 罐时要对角线旋紧旋钮。
三、实验步骤 实验前的预备工作
1. 清洗发酵罐：将发酵罐的电极拆下，旋钮选出，对发酵罐进行清洗
2. 检查气密性
1) 将阀门（发酵罐的出气阀）与打开，在实验过程中这是一直要打开的
2) 打开电源总闸，打开蒸汽发生器水，将水通入蒸汽发生器内，红灯亮时关闭水
3) 将空气压缩机的开关打开，向储气罐内通入空气，当压力到2kg（0.2mpa）时，关闭 空压机。
4) 通过进样孔向发酵罐内通入一定量的去离子水，使其没过空气管口。
5) 打开发酵罐的进气阀门。
6) 当罐内压力上升到0.05mpa时，关闭进气阀门，将发酵罐取样旋钮旋至zui紧以防漏气， 此时罐内压力在30min内保持不变则气密性良好。
3. 发酵罐的灭菌空消：
1. 30min后，打开出气阀门，调节大小使其稳定在0.03mpa
2. 在打开蒸汽发生器的阀门前，先将发酵罐的蒸汽出口阀门打开
3. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐的进气阀门，关闭进气阀以防倒吸，当温度上升到 121℃时，保持30min，注意罐内压力维持在一定的压力值（过大会有危险，过小温度难以上升）此时发酵的前期准备工作已就绪，开始准备发酵。
4. 30min后，泄压；关闭蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门，打开进空气的阀门 (防止罐体变形)
发酵步骤
(一) 实消
1. 冷却发酵罐（防止过热物料喷出），从加样孔内通入物料（物料要先全部溶解），打开 搅拌器； 2. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门；
3. 当罐内温度上升到90℃时，停止搅拌以防电极被烧坏；
4. 对空气过滤器灭菌；当温度上升到100℃时，打开空气过滤器的阀门，关闭进气阀， 再打开进气阀,对空气过滤器灭菌15min。
5. 实消；15min后，关闭空气过滤器的阀门与进气阀，当温度上升到121℃时，保持30min，进行实消的灭菌。
6. 30min后，泄压，打开进气阀，再对罐体进行降温；关闭所有的蒸汽进口阀，打开水 ，打开冷凝水的进出口阀（先出后进）。
(二) 接种
1. 对罐体进行降温，冷却到30℃左右；
2. 接种；在进样孔旁围上一圈脱脂棉，倒上酒精，点火对加样孔进行灭菌，灭菌后，由 进样孔进行接种。
(三) 开始发酵
1. 设置参数，温度设置在zui适温度，开始发酵；
2. 取样；每隔一定时间间隔取样一次，取样前要相对管道进行灭菌，打开取样器的阀门 取样，每次取样前都要对管道进行灭菌。将出样旋钮旋上，打开取样器的阀门，用离心管或试管接样，冷却后测od并放入冰箱。
(四) 发酵结束
1. 发酵结束后，将样品全部放出；
2. 关闭除出水阀外的所有阀门；
3. 将发酵罐电极拆下，清洗发酵罐。
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二、实验设备
实验室所用的发酵罐是由蒸汽发生器、空气压缩机、发酵罐和控制系统组成的。
1. 蒸汽发生器：黄灯亮代表需要进水，进水好后红灯亮，自动开始加热。其背后有一阀门， 是控制蒸汽流出的开关，常开。
2. 空气压缩机：摁下开关按钮起开始向储气罐内通入空气
3. 发酵罐:发酵罐上连有电极，当要打开发酵罐时要先将其拆下，避免损坏。在旋紧发酵 罐时要对角线旋紧旋钮。
三、实验步骤 实验前的预备工作
1. 清洗发酵罐：将发酵罐的电极拆下，旋钮选出，对发酵罐进行清洗
2. 检查气密性
1) 将阀门（发酵罐的出气阀）与打开，在实验过程中这是一直要打开的
2) 打开电源总闸，打开蒸汽发生器水，将水通入蒸汽发生器内，红灯亮时关闭水
3) 将空气压缩机的开关打开，向储气罐内通入空气，当压力到2kg（0.2mpa）时，关闭 空压机。
4) 通过进样孔向发酵罐内通入一定量的去离子水，使其没过空气管口。
5) 打开发酵罐的进气阀门。
6) 当罐内压力上升到0.05mpa时，关闭进气阀门，将发酵罐取样旋钮旋至zui紧以防漏气， 此时罐内压力在30min内保持不变则气密性良好。
3. 发酵罐的灭菌空消：
1. 30min后，打开出气阀门，调节大小使其稳定在0.03mpa
2. 在打开蒸汽发生器的阀门前，先将发酵罐的蒸汽出口阀门打开
3. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐的进气阀门，关闭进气阀以防倒吸，当温度上升到 121℃时，保持30min，注意罐内压力维持在一定的压力值（过大会有危险，过小温度难以上升）此时发酵的前期准备工作已就绪，开始准备发酵。
4. 30min后，泄压；关闭蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门，打开进空气的阀门 (防止罐体变形)
发酵步骤
(一) 实消
1. 冷却发酵罐（防止过热物料喷出），从加样孔内通入物料（物料要先全部溶解），打开 搅拌器； 2. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门；
3. 当罐内温度上升到90℃时，停止搅拌以防电极被烧坏；
4. 对空气过滤器灭菌；当温度上升到100℃时，打开空气过滤器的阀门，关闭进气阀， 再打开进气阀,对空气过滤器灭菌15min。
5. 实消；15min后，关闭空气过滤器的阀门与进气阀，当温度上升到121℃时，保持30min，进行实消的灭菌。
6. 30min后，泄压，打开进气阀，再对罐体进行降温；关闭所有的蒸汽进口阀，打开水 ，打开冷凝水的进出口阀（先出后进）。
(二) 接种
1. 对罐体进行降温，冷却到30℃左右；
2. 接种；在进样孔旁围上一圈脱脂棉，倒上酒精，点火对加样孔进行灭菌，灭菌后，由 进样孔进行接种。
(三) 开始发酵
1. 设置参数，温度设置在zui适温度，开始发酵；
2. 取样；每隔一定时间间隔取样一次，取样前要相对管道进行灭菌，打开取样器的阀门 取样，每次取样前都要对管道进行灭菌。将出样旋钮旋上，打开取样器的阀门，用离心管或试管接样，冷却后测od并放入冰箱。
(四) 发酵结束
1. 发酵结束后，将样品全部放出；
2. 关闭除出水阀外的所有阀门；
3. 将发酵罐电极拆下，清洗发酵罐。
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