艾美捷钥孔血蓝蛋白KLH使用说明
钥孔血蓝蛋白klh是通过添加磺基smcc交联剂活化的马来酰亚胺。主动钩子™klh快速偶联到肽和蛋白质上的游离巯基。这种活化的载体蛋白节省了时间和金钱，因为不需要单独的交联剂，反应是一步反应。
锁孔帽贝血蓝蛋白是一种广泛使用的载体蛋白，因为它的分子量大（4.5x105-1.3x107da聚集体）和大量伯胺，可以与交联剂反应以偶联肽。
钥孔血蓝蛋白klh有10毫克小瓶或我们的onequant™一次性使用线为8 x 2mg小瓶。
艾美捷钥孔血蓝蛋白klh#gbs-786-094是klh（锁孔帽贝血蓝蛋白）的一种预激活形式，具有被磺基smcc激活，并准备通过半胱氨酸残基。klh是从软体动物圆纹苏云虫中分离出来的，属于一个巨大的呼吸蛋白家族，血蓝蛋白，发现于软体动物和节肢动物。klh的大分子量（400‐3000kd）使其成为一种优异的免疫原的选择。钥孔血蓝蛋白klh共有300‐600个反应基团可用于连接和制作activehook™klh是一种出色的载体蛋白。onequant钥孔血蓝蛋白klh以onequant冻干形式提供™ 格式，2mg/瓶。
重要信息：
a.为了确保完-全耦合，我们建议使用推荐数量的试剂，因为这些试剂向其上的马来酰亚胺基团提供摩尔过量的肽载体蛋白。
b.对于不溶于1x optimizer缓冲液iii的肽，我们建议使用二甲基亚砜（<30%）。
c.该试剂盒设计用于通过游离巯基残基。埃尔曼试剂（类别号bc87）可以测定游离巯基。如果被氧化，蛋白质和肽可以被0.1-0.5%的β-巯基乙醇（类别号bc98）、5‐50mm dtt（类别号786‐227）或1‐10mm tcep（类别号786‐230）。还原后，必须去除还原剂，我们建议
使用凝胶过滤旋转柱（spinout™，目录号786‐170786‐171）。此方法不是适用于小肽（mw<1500）。
协议
1.溶解一小瓶（2mg）onequant™ 活动挂钩™500μl 1x优化器中的klh缓冲器™iii或适用于巯基反应的缓冲液。
2.使用前立即溶解2-10mg含巯基的肽或蛋白质在500μl 1x optimizer缓冲区中™iii或适用于巯基反应的缓冲液。
3.将含巯基的肽添加到activehook中™klh。翻转混合管4-5次。
4.在室温下培养30分钟。混合反应物并孵育在4°c下再加热1小时。
5.用合适的储存缓冲液（如pbs）透析反应1-2小时2-3改变透析缓冲液，以去除未偶联的肽。
6.透析后，载体蛋白-肽缀合物即可使用。承运人蛋白质-肽缀合物可以储存在-20°c下以备日后使用。
将‐nh2修饰为‐sh用于缺乏巯基的蛋白质和肽
1.将待巯基化的肽或蛋白质悬浮在50mm三乙醇胺中，0.15m nacl，1mm edta ph8.0。
2.加入3-4倍摩尔过量的特劳特试剂（cat#bc95）。
3.在氮气下，在室温下培养反应45分钟。
4.使用spinout从未反应的traut试剂中分离巯基化产物™列（spinout™gt‐600（目录号786‐170））或透析
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钥孔血蓝蛋白klh有10毫克小瓶或我们的onequant™一次性使用线为8 x 2mg小瓶。
艾美捷钥孔血蓝蛋白klh#gbs-786-094是klh（锁孔帽贝血蓝蛋白）的一种预激活形式，具有被磺基smcc激活，并准备通过半胱氨酸残基。klh是从软体动物圆纹苏云虫中分离出来的，属于一个巨大的呼吸蛋白家族，血蓝蛋白，发现于软体动物和节肢动物。klh的大分子量（400‐3000kd）使其成为一种优异的免疫原的选择。钥孔血蓝蛋白klh共有300‐600个反应基团可用于连接和制作activehook™klh是一种出色的载体蛋白。onequant钥孔血蓝蛋白klh以onequant冻干形式提供™ 格式，2mg/瓶。
重要信息：
a.为了确保完-全耦合，我们建议使用推荐数量的试剂，因为这些试剂向其上的马来酰亚胺基团提供摩尔过量的肽载体蛋白。
b.对于不溶于1x optimizer缓冲液iii的肽，我们建议使用二甲基亚砜（<30%）。
c.该试剂盒设计用于通过游离巯基残基。埃尔曼试剂（类别号bc87）可以测定游离巯基。如果被氧化，蛋白质和肽可以被0.1-0.5%的β-巯基乙醇（类别号bc98）、5‐50mm dtt（类别号786‐227）或1‐10mm tcep（类别号786‐230）。还原后，必须去除还原剂，我们建议
使用凝胶过滤旋转柱（spinout™，目录号786‐170786‐171）。此方法不是适用于小肽（mw<1500）。
协议
1.溶解一小瓶（2mg）onequant™ 活动挂钩™500μl 1x优化器中的klh缓冲器™iii或适用于巯基反应的缓冲液。
2.使用前立即溶解2-10mg含巯基的肽或蛋白质在500μl 1x optimizer缓冲区中™iii或适用于巯基反应的缓冲液。
3.将含巯基的肽添加到activehook中™klh。翻转混合管4-5次。
4.在室温下培养30分钟。混合反应物并孵育在4°c下再加热1小时。
5.用合适的储存缓冲液（如pbs）透析反应1-2小时2-3改变透析缓冲液，以去除未偶联的肽。
6.透析后，载体蛋白-肽缀合物即可使用。承运人蛋白质-肽缀合物可以储存在-20°c下以备日后使用。
将‐nh2修饰为‐sh用于缺乏巯基的蛋白质和肽
1.将待巯基化的肽或蛋白质悬浮在50mm三乙醇胺中，0.15m nacl，1mm edta ph8.0。
2.加入3-4倍摩尔过量的特劳特试剂（cat#bc95）。
3.在氮气下，在室温下培养反应45分钟。
4.使用spinout从未反应的traut试剂中分离巯基化产物™列（spinout™gt‐600（目录号786‐170））或透析
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