速度！12分钟Pooling 384个NGS文库
pooling是测序文库上机前的临门一脚。经过数小时乃至几天的实验，初始样品终于变成浓度、片段大小都符合质控指标的library嗷嗷待测。pooling实验通常由两位操作者协作。根据表单信息将文库归一化到一定浓度，再将想要合并测序的文库混合，耗时耗力。
事实上pooling*可以不需要密集的吸液移液操作，不需要这么多时间和精力投入，甚至就不需要移液器和吸头。采用echo声波移液系统，12分钟即可完成384个文库pooling1，而手工完成归一化和pooling需耗时长达3小时。
echo通过聚焦声波能量转移低至2.5nl的样品，不需要吸头，无物理接触。每秒传输几百个液滴实现nl到ul级的液体传输。echo可以微量化反应体系到几微升，甚至数百纳升，将样品从微孔板任意孔快速转移到目的板任意孔。在基因组学及合成生物学中，被应用到微量化ngs建库和快速pooling文库、引物、寡聚核苷酸探针当中。
echo一步法ngs文库pooling
echo不与文库样本直接接触，不需要费时间加载或清洗吸头，可以在不到一秒的时间将微孔板上的ngs文库转移到目标孔内。
高浓度文库不需额外稀释。通过nl至ul级液滴转移，将浓度归一化和pooling简化为一步进行。
数据管理和自动化操作可以避免人工操作失误，提高实验过程的可靠性。
echo可关联输入文件，软件自动完成高通量pooling
左：将需要pooling的各文库信息写入输入文件，采用echo一步法完成pooling。
右：比较384个文库的200 nl/文库等体积echo混样和等摩尔量echo混样。
结果显示经echo pooling后文库获得更加均一的测序量。
echo微量化ngs文库定量质控
echo可完成384孔甚至1536孔每板的超高通量微量化文库质控定量。声波移液含dna染料的缓冲溶液、文库到酶标板中进行荧光检测。或是进行文库qpcr检测体系构建，避免标准品梯度稀释的累积误差和气溶胶污染。文库定量的微量化能够减少试剂消耗，有效控制成本。此外，echo支持在软件中以表单的形式挑选某些文库做qpcr。整个实验过程数据可循，避免手工操作的窜孔等错误。
采用echo完成文库定量，微量化反应体系至2 ul，4 ul及8 ul绘制校准曲线
参考：
1.labcyte®: brochure | echo acoustic liquid handling for genomics research, version 1.0 | august 2017
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